A tecnologia do DNA recombinante se refere a um conjunto de técnicas que permite aos cientistas identificarem, isolarem, multiplicarem e expressarem genes de quaisquer organismos!

Com ela é possível realizar:

• Estudo dos genes de um organismo = Estudos genômicos;

• Estudo da regulação de um gene ou conjunto de genes;

• Desenvolvimento de Vacinas e de Vacinas de DNA;

• Desenvolvimento de Terapias gênicas;

• Produção de transgênicos;

• Produção de produtos biotecnológicos/medicamentos/enzimas;

• Diagnóstico médico;

• Tecnologia forense (crimes, paternidade, controle de qualidade);

• Estudo do produto final do gene: RNA/Proteína.

Nesse contexto, serão apresentadas as etapas da clonagem molecular:

• Isolamento de fragmentos de DNA (gene de interesse) a serem clonados.

• Inserção de DNA isolado em um vetor adequado para formar DNA recombinante.

• Introdução de DNA recombinante em um organismo adequado conhecido como hospedeiro.

• Seleção de células hospedeiras transformadas e identificação do clone contendo o gene de interesse.

• Multiplicação / Expressão do Gene introduzido no hospedeiro.

• Isolamento de múltiplas cópias do gene / proteína expressa pelo gene.

• Purificação da cópia / proteína do gene isolado

Você aprenderá todo passo a passo desde o planejamento e preparação do DNA recombinante à posterior expressão heteróloga da proteína em um sistema de expressão apropriado, para que então possa purificá-la. Essa visão geral de todo o espectro de clonagem molecular possibilita um planejamento coerente de acordo com os objetivos do experimento.